RealPAGE TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶(塑料板,12孔) Ver.760969-1.0
|
货号
|
名称
|
规格
|
|
RTH5101P
|
RealPAGE
TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶（塑料板,12孔）
|
10板/盒
|
● 产品介绍：
RealPAGE TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶适用于20–2,000 bp双链DNA及
20–2,000 nt 单链DNA的非变性PAGE分析，适合用于 DNA 电泳应用领域，包括分析限制性酶切、PCR产物、DNA印迹分析和引物分析。本产品为即用型预制凝胶，无需自行配制凝胶溶液和灌胶，可简化实验操作。具有良好的条带均一性和分辨率。兼容多种常用 mini 垂直电泳槽，如 Bio-Rad、天能、六一、君意东方等品牌的部分型号。
● 产品货号及选择：
|
货号
|
凝胶浓度
|
孔数
|
最大上样体积
|
推荐分离范围
|
溴酚蓝位置
（双链）
|
二甲苯菁位置
（双链）
|
|
RTH5101P-0005
|
5%
|
12
|
50 μL
|
200-2000 bp
|
~70 bp
|
~250 bp
|
|
RTH5101P-0010
|
10%
|
12
|
50 μL
|
50-1500 bp
|
~30 bp
|
~120 bp
|
|
RTH5101P-0015
|
15%
|
12
|
50 μL
|
20-1000 bp
|
~20 bp
|
~75 bp
|
● 技术参数：
|
胶板尺寸
|
宽 10 cm，高 8.2
cm，厚度为4 mm
|
|
凝胶尺寸
|
宽 8.2 cm，高 7.2
cm，厚度为1.1 mm
|
|
梳齿孔
|
12孔
|
|
推荐上样体积
|
推荐上样体积10-20 μL，最大上样体积50 μL
|
|
电泳缓冲液
|
TBE缓冲液（TB001）
|
|
上样缓冲液
|
6×非变性PAGE DNA上样缓冲液 (DL070)
|
|
染色溶液
|
RealSafe Red核酸染色剂（GR002）；RealSafe
Gold核酸染色剂（GR003）；RealSafe
All核酸染色剂（GR004）
|
● 贮存、效期及运输：
2–8 ℃保存，严禁冷冻。产品有效期为30天，具体有效期以包装标识为准。可常温运输。
● 使用说明：
一. 样品准备：
1.1 DNA 样品与 6×非变性 PAGE DNA 上样缓冲液（DL070）按 5:1 的体积比混合，混匀后上样。建议每孔核酸上样量约为 0.2–0.5 μg。
1.2 双链 DNA 样品可根据目标片段大小选择以下 DNA Marker：10 bp DNA Ladder（10–100 bp，RTM443）、20 bp
DNA Ladder（20–500 bp，RTM441）或25 bp DNA Ladder（25–500 bp，RTM444）。单链 DNA 样品可选择单链 DNA Marker（20–75 nt，RTM507）或单链 DNA
Marker（10–75 nt，RTM509）。
二. 电泳液的准备：
将5×TBE缓冲液（TB001）用蒸馏水稀释至1×后使用。
三. 电泳：
3.1 拆开预制胶包装，撕掉底部胶条，拔掉梳子，将加样孔朝下轻轻甩动胶板，以去除孔内可能残留的凝胶碎屑，将预制胶安装在合适的电泳槽中。
注：伯乐Mini III或Mini-PROTEAN Tetra Cell，天能VE-180，六一24K系列电泳槽请确保密封条的安装方向（如图1-4）。六一其他系列，君意东方JY-SCZ2/4，百晶BG-verMINI等电泳槽可以直接使用预制胶。不兼容Thermo Fisher Mini Gel Tank 系列电泳槽。
3.2内槽用电泳液没过加样孔，外槽加入电泳液没过电泳槽底部的阳极即可，用 1×TBE 缓冲液充分冲洗加样孔 2–3 次，以去除孔内残留的凝胶碎屑。
3.3 上样：将适量样品缓慢加入加样孔内。
3.4 将电泳槽盖子盖好，并将电源线插头插入电泳仪电源插孔(红对红，黑对黑)。建议以150 V恒压电泳约50–90
min。可根据溴酚蓝的迁移位置及目标片段大小适时终止电泳。
|
|
恒电压
|
起始电流
|
结束电流
|
电泳时间
|
|
推荐电压
|
150 V
|
15-20 mA/胶
|
5-10 mA/胶
|
≥60 min
|
注：恒压电泳过程中电流会随运行时间发生变化，表中电流值仅供参考。
3.5 使用配套工具撬动胶板（参见示意图），小心剥下凝胶。
四. 染色：
电泳结束后，可使用核酸染料或配套核酸PAGE染色试剂盒（RTS5102或RTS5103）进行染色。不同核酸染料对双链和单链核酸的染色灵敏度可能存在差异。为获得较佳染色效果，推荐使用 RealSafe Red （GR002），RealSafe Gold（GR003）或 RealSafe All（GR004）。
以下以 RealSafe Red 核酸染料（GR002）为例说明染色操作。
4.1 漂洗：将凝胶置于适量蒸馏水中漂洗 3–5 min。
4.2 染色液配制：
|
RealSafe Red 工作染色液配制
|
|
1×TBE
|
100 mL
|
|
RealSafe Red核酸染料
|
10 μL
|
4.3 染色：
将凝胶浸泡于工作染色液中，室温避光条件下以 40–60 rpm 轻摇染色 30 min。
4.4 观察：
使用紫外凝胶成像系统或蓝光成像系统观察并记录条带。
● 实验示例：
实验示例：
