RealPAGE TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶(塑料板,12孔) Ver.760969-1.0
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货号
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名称
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规格
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RTH5101P
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RealPAGE
TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶(塑料板,12孔)
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10板/盒
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● 产品介绍:
RealPAGE TBE-PAGE核酸非变性电泳预制胶适用于20–2,000 bp双链DNA及
20–2,000 nt 单链DNA的非变性PAGE分析,适合用于 DNA 电泳应用领域,包括分析限制性酶切、PCR产物、DNA印迹分析和引物分析。本产品为即用型预制凝胶,无需自行配制凝胶溶液和灌胶,可简化实验操作。具有良好的条带均一性和分辨率。兼容多种常用 mini 垂直电泳槽,如 Bio-Rad、天能、六一、君意东方等品牌的部分型号。
● 产品货号及选择:
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货号
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凝胶浓度
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孔数
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最大上样体积
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推荐分离范围
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溴酚蓝位置
(双链)
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二甲苯菁位置
(双链)
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RTH5101P-0005
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5%
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12
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50 μL
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200-2000 bp
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~70 bp
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~250 bp
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RTH5101P-0010
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10%
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12
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50 μL
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50-1500 bp
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~30 bp
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~120 bp
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RTH5101P-0015
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15%
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12
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50 μL
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20-1000 bp
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~20 bp
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~75 bp
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● 技术参数:
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胶板尺寸
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宽 10 cm,高 8.2
cm,厚度为4 mm
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凝胶尺寸
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宽 8.2 cm,高 7.2
cm,厚度为1.1 mm
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梳齿孔
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12孔
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推荐上样体积
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推荐上样体积10-20 μL,最大上样体积50 μL
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电泳缓冲液
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TBE缓冲液(TB001)
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上样缓冲液
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6×非变性PAGE DNA上样缓冲液 (DL070)
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染色溶液
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RealSafe Red核酸染色剂(GR002);RealSafe
Gold核酸染色剂(GR003);RealSafe
All核酸染色剂(GR004)
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● 贮存、效期及运输:
2–8 ℃保存,严禁冷冻。产品有效期为30天,具体有效期以包装标识为准。可常温运输。
● 使用说明:
一. 样品准备:
1.1 DNA 样品与 6×非变性 PAGE DNA 上样缓冲液(DL070)按 5:1 的体积比混合,混匀后上样。建议每孔核酸上样量约为 0.2–0.5 μg。
1.2 双链 DNA 样品可根据目标片段大小选择以下 DNA Marker:10 bp DNA Ladder(10–100 bp,RTM443)、20 bp
DNA Ladder(20–500 bp,RTM441)或25 bp DNA Ladder(25–500 bp,RTM444)。单链 DNA 样品可选择单链 DNA Marker(20–75 nt,RTM507)或单链 DNA
Marker(10–75 nt,RTM509)。
二. 电泳液的准备:
将5×TBE缓冲液(TB001)用蒸馏水稀释至1×后使用。
三. 电泳:
3.1 拆开预制胶包装,撕掉底部胶条,拔掉梳子,将加样孔朝下轻轻甩动胶板,以去除孔内可能残留的凝胶碎屑,将预制胶安装在合适的电泳槽中。
注:伯乐Mini III或Mini-PROTEAN Tetra Cell,天能VE-180,六一24K系列电泳槽请确保密封条的安装方向(如图1-4)。六一其他系列,君意东方JY-SCZ2/4,百晶BG-verMINI等电泳槽可以直接使用预制胶。不兼容Thermo Fisher Mini Gel Tank 系列电泳槽。
3.2内槽用电泳液没过加样孔,外槽加入电泳液没过电泳槽底部的阳极即可,用 1×TBE 缓冲液充分冲洗加样孔 2–3 次,以去除孔内残留的凝胶碎屑。
3.3 上样:将适量样品缓慢加入加样孔内。
3.4 将电泳槽盖子盖好,并将电源线插头插入电泳仪电源插孔(红对红,黑对黑)。建议以150 V恒压电泳约50–90
min。可根据溴酚蓝的迁移位置及目标片段大小适时终止电泳。
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恒电压
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起始电流
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结束电流
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电泳时间
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推荐电压
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150 V
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15-20 mA/胶
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5-10 mA/胶
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≥60 min
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注:恒压电泳过程中电流会随运行时间发生变化,表中电流值仅供参考。
3.5 使用配套工具撬动胶板(参见示意图),小心剥下凝胶。
四. 染色:
电泳结束后,可使用核酸染料或配套核酸PAGE染色试剂盒(RTS5102或RTS5103)进行染色。不同核酸染料对双链和单链核酸的染色灵敏度可能存在差异。为获得较佳染色效果,推荐使用 RealSafe Red (GR002),RealSafe Gold(GR003)或 RealSafe All(GR004)。
以下以 RealSafe Red 核酸染料(GR002)为例说明染色操作。
4.1 漂洗:将凝胶置于适量蒸馏水中漂洗 3–5 min。
4.2 染色液配制:
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RealSafe Red 工作染色液配制
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1×TBE
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100 mL
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RealSafe Red核酸染料
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10 μL
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4.3 染色:
将凝胶浸泡于工作染色液中,室温避光条件下以 40–60 rpm 轻摇染色 30 min。
4.4 观察:
使用紫外凝胶成像系统或蓝光成像系统观察并记录条带。
● 实验示例:
实验示例:
