5×速溶型蛋白上样缓冲液(双色，变性，还原，无气味)    Ver.760864-1.0

● 产品简介：

本产品为5×浓缩型蛋白上样缓冲液，采用新型变性剂取代SDS作为阴离子去垢剂，可有效促进蛋白质变性；同时采用无气味还原剂取代传统还原剂（BME或DTT），无不愉快刺激性气味，绿色环保，可有效还原蛋白质分子内及分子间二硫键；高助沉剂配方具有良好的样品沉降性能，可以不用-20℃贮存，4℃取出后溶化速度快，吸样不粘稠；另外，该缓冲液中含有两种示踪染料：蓝色的溴酚蓝和一种红色染料，可以指示SDS-PAGE电泳过程以及Weastern blot的转膜效率（红色染料）。

本产品含有变性剂和还原剂，适用于常规SDS-PAGE样品的上样制备，不适合于蛋白的非变性电泳和变性非还原电泳。

● 产品特点：

稳定可靠：添加稳定型还原剂，4℃有效贮存1年；

使用方便：采用新型蛋白变性剂，低温溶解性能良好，可以常温快速溶化；

绿色环保：无明显刺激性巯基气味，有效保护使用者的健康；

沉降迅速：高助沉剂配方，样品沉降快速，不易漂样，加样方便；

适用广泛：适用于Tris-Glycine、Bis-Tris、Tris-Acetate及Tricine等常见变性PAGE体系。

● 贮存、效期及运输：

4℃贮存；有效期1年；常温运输。

● 产品组成：

Tris，甘油，变性剂，溴酚蓝和还原剂等。

●  使用方法：

1. 彻底溶化：使用前观察溶液状态，4℃贮存条件下会出现轻微析出，常温溶化并充分混匀，待溶液澄清后使用。

2. 样品混合：按1体积本产品与4体积蛋白样品混合，使上样缓冲液终浓度为1×，充分混匀。

3. 样品变性：推荐70°C加热10 min。对于常规可溶性蛋白，也可采用95°C加热5 min。对于易聚集蛋白、多跨膜蛋白或其他热敏感蛋白，建议优先采用70°C处理。加热结束后短暂离心，将液体收集至管底。

4. 电泳：取适量处理后的样品加入加样孔，按照相应电泳体系进行电泳。本产品可用于Tris-Glycine、Bis-Tris、Tris-Acetate及Tricine等常见变性蛋白电泳体系。

● 注意事项：

1. 本产品主要设计用于已提取蛋白样品的变性、还原及电泳上样处理。工作浓度下上样缓冲液具有蛋白变性及一定的细胞裂解能力，但对于完整细胞、组织或富含膜结构的样品，其直接裂解能力可能弱于高浓度SDS裂解体系。不建议使用该产品直接作为裂解液裂解细胞或组织，使用该产品直接裂解的样品电泳检测时会有拖尾现象。

2. 由于含有还原剂，使用本产品上样的凝胶在银染时可能会发黄或出现条纹，需测试后使用。

3. 本产品不适用于等电聚焦IEF时样品的上样，也不适用于Native PAGE或BN-PAGE。

4. 不同凝胶系统中，电泳中红色染料泳动速度和溴酚蓝有快慢不同，红色染料接近凝胶底部即可拆胶。

● 实验示例：

1.Bis-Tirs胶中不同蛋白上样缓冲液的迁移图：

2. Tris-甘氨酸胶中不同蛋白上样缓冲液的迁移图：

Tris-甘氨酸凝胶体系和Bis-Tris凝胶体系中不同蛋白上样缓冲液指示前沿图例
样品：Jurkat细胞用IP细胞裂解液（WL1020）提取，用不同上样缓冲液配成1μg/μl上样液，上样各10μl
凝胶：4-20% RealPAGE Tris-甘氨酸预制胶（RTD6119-0420）；4-20% Bis-Tris凝胶（ACE）
泳道3：友商LT101S，速溶型蛋白上样缓冲液(变性， 还原型， 5× )
泳道4：PL121，5×速溶型蛋白上样缓冲液(蓝色，变性，还原，无气味)，前沿为溴酚蓝
泳道5：PL120 5×速溶型蛋白上样缓冲液(双色，变性，还原，无气味)，在TG胶中初始电泳
红色前沿迁移速度快于溴酚蓝，结束电泳时红色前沿迁移速度慢于溴酚蓝
泳道6：5×蛋白上样缓冲液（使用低毒性巯基试剂取代BME），前沿为溴酚蓝
泳道7：PL113，5×MonoColor蛋白上样缓冲液（单染料，变性，还原，无气味），前沿为溴酚蓝
泳道8：PL090，5×双色蛋白上样缓冲液 (变性，还原），在TG胶中初始电泳
红色前沿迁移速度快于溴酚蓝，结束电泳时红色前沿迁移速度慢于溴酚蓝
泳道9：5×蛋白上样缓冲液 (变性，还原，还原剂为BME），前沿为溴酚蓝
泳道10：PL080，5×MonoColor 蛋白上样缓冲液（变性，还原），前沿为溴酚蓝

3. Tris-醋酸胶中不同蛋白上样缓冲液的迁移图：

不同蛋白上样缓冲液在Tris醋酸胶和Bis-Tris胶中电泳，指示前沿效果图
样品：Jurkat细胞用IP细胞裂解液（WL1020）提取，用不同上样缓冲液配成1μg/μl上样液，上样各10μl
凝胶：3-8% RealPAGE Tris-醋酸预制胶（RTD6154-0308）；NuPAGE 4-12% Bis-Tris（Thermo NP0322BOX）
PL121 5×速溶型蛋白上样缓冲液(蓝色，变性，还原，无气味)，前沿为溴酚蓝
PL120 5×速溶型蛋白上样缓冲液(双色，变性，还原，无气味)，红色前沿迁移速度快于溴酚蓝
PL118 4×LDS蛋白上样缓冲液（变性，非还原），配制样品时添加终浓度50mM DTT，
前沿为G-250，速度快于溴酚蓝
PL080 5×MonoClolor 蛋白上样缓冲液（变性，还原），前沿为溴酚蓝

4. Tricine胶中不同蛋白上样缓冲液的迁移图：