5×MonoColor蛋白上样缓冲液(单染料,变性,还原,无气味) Ver.760951-2.0
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货号
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产品名称
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规格
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PL113
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5×MonoColor蛋白上样缓冲液
(单染料,变性,还原,无气味)
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10×1 ml
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● 产品简介:
本制品是蛋白质样品进行 SDS-PAGE电泳时的上样缓冲液。制品中含有示踪色素溴酚蓝(Bromophenol Blue),可以确认电泳的进行情况。使用本制品,蛋白质在电泳胶中可以得到很好地分离。电泳后用考马斯亮蓝或者银染色等方法染色后,蛋白质电泳带能够得到清晰显示。
该产品使用了经典还原剂DTT和巯基乙醇的替代物,无DTT和巯基乙醇的不愉快气味,无毒,无刺激性气味。
● 保存、效期及运输:
-20℃保存,有效期1年,湿冰运输。
● 产品组成:
Tris,甘油,SDS,溴酚蓝,还原剂等,pH~6.8,不含EDTA。
● 使用方法:
溶化-混合-变性-上样
1.在常温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液,彻底溶化后混匀,使用完毕后置于-20℃保存。
2. 将缓冲液与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
3.将蛋白样品置于95℃中加热5-10分钟。
4.待蛋白样品充分变性后冷却至常温,快甩离心收集到管底,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内电泳。
实验示例:
1 PL113还原力测试:
电泳:RTD6117-0420预制胶,200V 55min
样品处理: BSA,不同上样缓冲液配制成0.5μg/μl 上样5μl=2.5μg
TBP鼠单抗,不同上样缓冲液配成0.5μg/μl 上样10μl=5μg
样品均95度 5min
1 5×变性非还原蛋白上样缓冲液(PL112)
2-6 5×MonoColor蛋白上样缓冲液(单染料,变性,还原,无气味)(PL113)
7 5×BME蛋白上样缓冲液
8 5×MonoClolor 蛋白上样缓冲液(变性,还原)(PL080)
结论:
1 BSA变性非还原主带分子量变小,低于66kD
2 TBP单抗变性非还原为一条带,大小大于180kD,变性还原后为两条带
2. Tris-甘氨酸凝胶体系和Bis-Tris凝胶体系中不同蛋白上样缓冲液指示前沿图例
样品:Jurkat细胞用IP细胞裂解液(WL1020)提取,用不同上样缓冲液配成1μg/μl上样液,上样各10μl
凝胶:4-20% RealPAGE Tris-甘氨酸预制胶(RTD6119-0420);4-20% Bis-Tris凝胶(ACE)
泳道3:友商LT101S,速溶型蛋白上样缓冲液(变性, 还原型, 5× )
泳道4:PL121,5×速溶型蛋白上样缓冲液(蓝色,变性,还原,无气味),前沿为溴酚蓝
泳道5:PL120 5×速溶型蛋白上样缓冲液(双色,变性,还原,无气味),在TG胶中初始电泳
红色前沿迁移速度快于溴酚蓝,结束电泳时红色前沿迁移速度慢于溴酚蓝
泳道6:5×蛋白上样缓冲液(使用低毒性巯基试剂取代BME),前沿为溴酚蓝
泳道7:PL113,5×MonoColor蛋白上样缓冲液(单染料,变性,还原,无气味),前沿为溴酚蓝
泳道8:PL090,5×双色蛋白上样缓冲液 (变性,还原),在TG胶中初始电泳
红色前沿迁移速度快于溴酚蓝,结束电泳时红色前沿迁移速度慢于溴酚蓝
泳道9:5×蛋白上样缓冲液 (变性,还原,还原剂为BME),前沿为溴酚蓝
泳道10:PL080,5×MonoColor 蛋白上样缓冲液(变性,还原),前沿为溴酚蓝