Real Taq DNA Polymerase
● 储存条件:-20℃ 保存
● 浓 度: 5 U/ml
● 产品简介
Real Taq
DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，其分子量为94 KD。具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性，无3’-5’外切酶活性。在PCR反应中，Real Taq DNA Polymerase延伸速度为1-2 kb/分钟，产物3’端带A，可直接用TA载体克隆。
● 活性定义
1单位(U) Real Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
● 酶贮存缓冲液
20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol
● 10×Taq Buffer
200
mM Tris-HCl (pH 8.4);200
mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分。
● 适用范围
一般用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等，产物可以直接用于T/A载体克隆。
● 反应举例：
注意：以下举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况，设定最佳反应条件。
以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段
1. 反应体系的建立：50 ml反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系)：
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Template
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<1mg
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Primer
1（10 mM）
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1 ml
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Primer
2（10 mM）
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1 ml
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10×Taq Buffer
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5 ml
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dNTP
Mixture(10 mM)
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1 ml
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Taq
(5 U/ml)
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0.5 ml
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ddH2O
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补至 50 ml
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2. PCR反应循环的设置：
94℃ 3 min
94℃ 30 sec
55℃ 30 sec 30
cycles
72℃ 1 min
72℃ 5 min
3. 结果检测：反应结束后取5 ml反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。