快速半干转转印试剂盒
Rapid Semi-Dry Transfer Blot Kit Ver740158
|
货号
|
名称
|
规格
|
|
RT5040
|
快速半干转转印试剂盒
|
20次
|
● 产品组成：
|
货号
|
名称
|
规格
|
贮存
|
|
RT5030
|
5×RealBlot快速半干转转膜缓冲液
|
500 ml
|
4℃
|
|
SP1010
|
半干转转印滤布
|
20张/包
|
RT
|
|
ML-NC-152045-5
|
NC膜
|
5张/包
|
RT
|
|
RTD6301
|
丽春红染色液
|
100 ml
|
RT
|
|
|
说明书
|
一份
|
|
● 产品简介：
快速半干转转印试剂盒使用半干转法（Semi-dry blot）方法，配套快速半干转仪器能在10-15分钟内高效快速地将蛋白转移到印迹膜（NC膜）上。
特点：
环境友好：快速转膜液不使用甲醇，减轻了对实验者和环境的伤害。
兼容性好：快速转膜液能兼容Laemmli胶，预制胶，Bis-Tris胶等多种凝胶。
节省时间：快速转膜液能在10-15分钟内完成蛋白的转印。
以每次转印使用200 ml 1×RealBlot快速半干转转膜缓冲液计算，该产品可以至少使用20次。
● 贮存及运输：
按照标签温度贮存；有效期一年；常温运输。
● 使用说明：
1 按照下表配制1×RealBlot快速半干转转膜缓冲液：
|
加入顺序
|
组份
|
1×快速转膜液配制量 200ml
|
|
1
|
5×快速转膜液
|
40 ml
|
|
2
|
超纯水
|
120 ml
|
|
3
|
无水乙醇
|
40 ml
|
注：按照顺序加入各种溶液。如果加入转膜液后没有用水冲洗称量容器，加入乙醇会产生沉淀。
2 将滤布浸泡在1×快速转膜液中，完全浸湿3-5分钟。
3 根据凝胶大小将NC膜裁剪到凝胶近似大小，完全浸泡在转膜缓冲液中。
4 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS。
5 按照顺序做好转印三明治结构：
1 负极（阴极）
2一张四层滤布
3 凝胶
4 转印膜
5一张四层滤布
6 正极（阳极）
6 用滚轮赶出气泡。
7 半干转推荐使用恒流转移：
|
|
一块小型胶（7.3×8.5 cm）
|
两块小型胶（7.3×8.5 cm）或一块中型胶（8.5×13.5 cm）
|
|
1.5 mm厚度凝胶
|
下列条件基础上增加2分钟
|
下列条件基础上增加2分钟
|
|
大于130 kD
|
恒流1.3 A，15分钟
|
恒流2.5 A，15分钟
|
|
5-130 kD
|
恒流1.3 A，10分钟
|
恒流2.5 A，10分钟
|
|
小于30 kD
|
恒流1.3 A，7分钟
|
恒流2.5 A，7分钟
|
注：不同厂家半干转仪器设置可能有所不同，请根据厂家说明书适当调整。
8 转膜效率检测：
转膜结束后，用蒸馏水漂洗NC膜，适量丽春红染色液染色2-5分钟，检测转膜效率。