半干转转印对滤纸要求较高，要用超厚滤纸，如伯乐厚度2.4mm滤纸（伯乐货号：1703965）。或者选择半干转转印滤布（货号：SP1010）

5×RealBlot快速半干转转膜缓冲液

             5×RealBlot Rapid Semi-Dry Transfer buffer        Ver740158

● 产品组成：

● 产品简介：

5×RealBlot快速半干转转膜缓冲液使用独特配方，使用半干转法（Semi-dry blot）方法，能在10-15分钟内高效快速地将蛋白转移到印迹膜（PVDF膜或NC膜）上。

特点：

环境友好：快速转膜液不使用甲醇，减轻了对实验者和环境的伤害。

兼容性好：快速转膜液能兼容Laemmli胶，预制胶，Bis-Tris胶等多种凝胶。

节省时间：快速转膜液能在10-15分钟内完成蛋白的转印。

以每次转印使用100 ml 1×RealBlot快速半干转转膜缓冲液计算，该产品可以使用25次。

● 贮存及运输：

   4-8℃贮存；有效期一年；常温运输。

● 使用说明：

转膜前的准备：

2张半干转专用超厚滤纸（厚度2.4 mm）或者半干转转印滤布（货号：SP1010）；裁好的转印膜；足够的1×RealBlot快速半干转转膜缓冲液；无水甲醇（处理PVDF膜用）

1 按照下表配制1×RealBlot快速半干转转膜缓冲液：

注：按照顺序加入各种溶液。如果加入转膜液后没有用水冲洗称量容器，加入乙醇会产生沉淀。

2 将滤纸或滤布浸泡在1×快速转膜液中，完全浸湿3-5分钟。

3 PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒，浸泡在1×快速转膜液中，平衡5分钟。NC膜无需处理，直接浸泡在转膜缓冲液中。

4 将凝胶在超纯水中浸泡漂洗2分钟，去除胶表面的SDS。

1 负极（阴极）

2一张超厚滤纸或四层滤布

3 凝胶

4 转印膜

5一张超厚滤纸或四层滤布

6 正极（阳极）

6 用滚轮赶出气泡。

7 半干转推荐使用恒流转移：

注：不同厂家半干转仪器设置可能有所不同，请根据厂家说明书适当调整。

电泳：4-18%预制胶
电泳：1×TGS 200V 57-23mA 50min
滤纸：2.4mm厚滤纸（Bio-Rad 1703965）
转印膜：0.22 NC膜（Cat：ML-NC-152022-5）
仪器：Turbo半干转机器 恒流1.3A 10min
染色：膜丽春红染色