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1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液(变性电泳,粉末型)

1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液(变性电泳,粉末型)

产品编号:TG190P

产品规格:10×1升

数量
价格 ¥300

1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液(变性电泳,粉末型)

●  产品组成:

货号

名称

规格

TG190P

1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液(变性电泳,粉末型)

10×1L

 

说明书

一份

产品简介:

本产品为即用型SDS-PAGE快速电泳缓冲液(Fast Running Buffer for SDS-PAGE),由Tris-Glycine电泳缓冲液优化而来,适用于Tris-Glycine体系(Laemmli体系)蛋白凝胶电泳。与传统的Tris-Glycine电泳缓冲液相比,使用本产品电泳时无需根据分离胶和浓缩胶调整不同电压,可全程200-250 V恒压电泳,约20-35 min可完成电泳,大大节约时间,并且对小分子蛋白分离效果更好,可使预染蛋白Marker中10 kD与15 kD条带分离并清晰可见(凝胶浓度8%以上),达到快速高效分离蛋白的作用。

本产品为预混粉末,使用前需要用水配制溶解,但无需调节pH值,pH 8.0-8.5。

贮存和效期:

常温贮存,常温运输,有效期2年;配成溶液后,4℃贮存,有效期1-2周。

用前必读:

1. 和传统的SDS-PAGE电泳液(Laemmli系统,1×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1% SDS,pH8.3)相比,本快速电泳液可以大幅加快电泳速度,缩短电泳时间。推荐150-200V恒压电泳,通常20-35分钟就能完成电泳。

2. 使用快速电泳缓冲液单板胶电泳时,稳压200 V,起始电流在60-70 mA,如果同时电泳2板胶或者4板胶,电流会升高,请根据需求采取降温措施。

3. 对于低浓度例如6%、8%或10%的固定浓度胶,本快速电泳液比传统电泳液具有更好的分离效果,可以达到类似梯度胶的分离效果,更适合小分子量蛋白电泳。产生相同分离效果时,使用本快速电泳液可使用浓度更低的分离胶,例如使用传统电泳液对10%、12%或15%分离胶进行电泳时,使用本快速电泳液时对应的分离胶只需要分别为6%、8%和10%,电泳效果基本一致。并且由于胶浓度较低,可以增强转膜效率,提高WB检测灵敏度。

不同蛋白大小选择不同的分离胶浓度,参考下表:

Laemmli系统

SDS-PAGE分离胶浓度

最佳分离范围(kD

1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液

最佳分离范围(kD

1×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液

6%

25-300

50-350

8%

10-250

35-300

10%

5-150

20-150

12%

3-100

15-100

15%

低于60

10-80

4. 本快速电泳液含有SDS,适用于变性胶蛋白电泳,不适用于非变性电泳(Native-PAGE)。

5. 该快速电泳缓冲液建议用于经典Laemmli系统配制的凝胶,经测试可以达到最优的分离效果。对于其他电泳系统如Bis-Tris系统,HEPES系统,Tris-醋酸系统,Tricine系统等,需要经过验证测试后使用。

6. 本快速电泳液可以适当回收,回收后的电泳液可以作为外槽电泳液再使用1-2次。如果希望获得最佳的电泳效果,请勿使用回收的电泳液。内槽缓冲液每次都需要使用新鲜配制的电泳缓冲液。

使用说明:

1.  即用型1×SDS-PAGE快速电泳缓冲液配制:

1 L包装的SDS-PAGE快速电泳液(粉末装),倒入到烧杯中,加入超纯水至总体积约为900 ml,漩涡搅拌溶解,定容到1 L并混匀,即配成即用型1×SDS-PAGE快速电泳液,溶液型缓冲液建议4℃贮存,可保存1-2周。

注:配制好的电泳液放置时间不宜超过两周。如果出现变色或沉淀请重新配制新鲜的电泳液。

2.  电泳条件:

电压建议为150-200V。一般情况下,恒压200 V电泳时,对于浓度为10%的分离胶仅需20-25分钟即可完成电泳。如果需获得更加平整和锐利的条带,可以把电压调整为100-150V,此时电泳时间需要适当延长。

● 实验示例:






 
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