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非变性电泳蛋白质Marker(45-880 kD)

非变性电泳蛋白质Marker(45-880 kD)

产品编号:RTD6137

产品规格:20次

数量
价格 ¥500

购买前先必读

非变性蛋白电泳Marker转膜问题

http://www.real-times.com.cn/news_detail.aspx?NewsID=248


非变性电泳蛋白质Marker45-880 kD

Native Electrophoresis Protein Marker45-880 kD

●产品编号及规格:

RTD6137   20次 100 μl

●储存及运输条件:

-20℃保存,湿冰运输,有效期为12个月。

产品简介:

    本产品有4种蛋白组成,分子量范围为45-880 kD,经过非变性电泳后,用考马斯亮蓝染色后可以得到5条主带。

蛋白名称

分子量(kD)

蛋白来源

pI

说明

Ferritin

440

880

equine spleen

N/A

非变性下440kD880 kD

Carbonic Anhydrase

300

Bovine Erythrocytes

6.4

单体分子量29kD,非变性下为聚体,表现为多种电荷异构体(charge isomer

Albumin

66

bovine serum

4.6-5.8

球蛋白,单体分子量66 kD,非变性下可形成少量二聚体

Ovalbumin

45

egg white

4.71

4.59

球蛋白,分子量为45kD,非变性条件下大于45kD会出现电荷异构体(charge isomer

使用说明:

1. 取出产品后,常温融化后,彻底混匀,上样电泳。

注:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,1.0厚度10齿梳子加样孔上样5 μl1.0厚度15齿梳子加样孔上样量2.5 μl,其他规格梳子请适当调整上样量。

2. 该产品不含蛋白凝胶制备试剂,您可以选择非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒(货号:RTD6130)或者蛋白预制胶(货号RTD6118)。如自备试剂,经典Laemmli系统中把制胶溶液、电泳缓冲液和上样缓冲液中的SDS和还原剂(DTT或β-巯基乙醇)全部去除即可进行非变性电泳。

3. 电泳条件:

建议使用8%非变性等度胶或者4-15%非变性梯度胶进行电泳。

恒电压

150-200 V

起始电流

27-35 mA/板胶

结束电流

7-10 mA/板胶

电泳时间

50-80min+

4. 电泳结束后,考马斯亮蓝染色,观察结果。

注:使用银染染色时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,需要适当降低Marker上样量,一般稀释50倍后上样。

注意:

1.本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE)。
2. 蛋白非变性电泳条件下,不能精确判断蛋白的分子量大小。因为在非变性条件下,蛋白的电荷,空间结构,物化性质等都对蛋白的迁移有影响。
3.非变性蛋白电泳Marker(RTD6137,RTD6142,RTD6144)由于要保持蛋白的天然结构,都没有偶联染料,在电泳时基本都看不到条带;然而,RTD6137和RTD6144中的440 kD和880 kD由于天然蛋白中含有铁离子,使得电泳后在胶上可见淡黄色,其中440 kD颜色更深。凝胶转膜后,膜上也可以看到黄色的440 kD条带,可以大体判断Marker转膜的效果。
4. 非变性Marker转膜后可以后用丽春红染色液(货号:RTD6301)染膜,可以看到Marker条带,顺便可以检测转膜效率,然而要注意的是丽春红染色灵敏度比较低,可能不能完全看到完整的Marker条带。

● 实验示例:

 





使用RTD6137非变性电泳蛋白质Marker45-880 kD产品发表部分文章列表:

1. [2022 IF=8.0] Tektin bundle interacting protein, TEKTIP1, functions to stabilize the tektin bundle and axoneme in mouse sperm flagella

Author: Xin?Yan Geng,Hui?Juan Jin, Lan Xia.Bin?Bin Wang,Su?Ren Chen

Marker: RTD6137非变性电泳蛋白质Marker(45-880 kD)

Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2024) 81:118 

Institution: Beijing Normal University

Paper linkhttps://doi.org/10.1007/s00018-023-05081-3


 
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