PCR反应试剂盒 ( 2000bp )
货号：RTC3105
● 简介：
本试剂盒包含完成PCR反应所需全部试剂，可进行PCR实验的教学和科研。其中模板为质粒DNA；引物为根据质粒DNA序列设计的上、下游引物；2×Taq
PCR MasterMix包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。使用本试剂盒进行PCR反应后，PCR产物大小应为2000bp。
● 贮存：-20℃。有效期一年。
● 包装：20次
● 试剂盒组成：
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组成
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浓度
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体积
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模板
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10
ng/μl
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30
μl
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上游引物（2000
FW）
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10
μM
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30
μl
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下游引物（2000
RV）
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10
μM
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30
μl
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2×Taq
PCR MasterMix(含染料)
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-
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2×500
μl
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去离子水
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-
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1
ml
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● 实验步骤：
1.
冰浴中彻底融化模板，引物和2×Taq
PCR MasterMix，混匀后快甩离心将溶液收集到管底。
2.
按照下表在0.2ml
PCR管中制备反应体系：
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50μl反应体系
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上游引物（2000FW） 10μM
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1 μl
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下游引物（2000RV） 10μM
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1 μl
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模板
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1 μl
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2×Taq
PCR MasterMix
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25 μl
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水
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22 μl
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3.
快甩离心将反应液收集到管底。
4.
PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5.
PCR仪上执行以下程序：
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步骤
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温度
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时间
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循环数
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初始变性
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94℃
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5 min
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1
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变性
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94℃
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30 sec
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30
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退火
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54℃
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30 sec
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延伸
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72℃
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2 min
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最后延伸
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72℃
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5 min
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1
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6. 反应完成后，取5ml反应液，1％琼脂糖凝胶电泳，观察条带情况。