Anti-mtHSP70抗体(兔多抗,线粒体基质内参)
Anti-mtHSP70 Antibody(Polyclonal Antibody from Rabbit)
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产品编号
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产品名称
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规格
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RGM1260
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Anti-mtHSP70抗体(兔多抗)
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20 μl
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● 产品简介
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来源
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用途及稀释比例
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抗体类型
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种属反应
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分子量
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Rabbit
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WB 1:1000-2000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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多克隆抗体
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Human
Rat
Mouse
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变性
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~70 kD
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注:WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry; IF,
Immunofluorescence
mtHSP70也称为GRP75,最早是在葡萄糖限制(glucose starvation)条件下表达上调的一类蛋白中被发现,因此命名为Glucose?regulated protein 75(GPR75)。随后研究发现该蛋白主要定位在线粒体,并属于 HSP70 分子伴侣家族。因此在不同研究领域中出现了多个名称: GRP75 = mtHSP70 = Mortalin = HSPA9,其中Mortalin 的名称来源于其与细胞永生化(immortalization)相关的研究。mtHSP70是 HSP70 家族成员之一,是线粒体中最重要的分子伴侣蛋白之一,该蛋白主要定位在线粒体基质中,参与线粒体蛋白导入、蛋白折叠以及线粒体蛋白质量控制等关键过程。
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
● 贮存形式:
1 mg/ml抗体溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及运输条件:
-20℃保存,一年有效;避免反复冻融;湿冰运输。
● 使用说明:
1. Western Blot杂交(ECL显色):1:1000-2000稀释,常温孵育1-2 h或4℃过夜。
2. 免疫荧光(IF)和免疫组化(IHC):1:200-1000稀释。
● 实验示例:
1.变性检测:
小鼠肾脏组织线粒体mtHSP70检测
样品:小鼠肾脏组织用不同方法动物线粒体提取试剂盒提取,3K表示300g离心收集线粒体沉淀,
12K表示12000 g离心力收集线粒体沉淀;
CY为提取上清-胞浆蛋白;Mt为提取线粒体蛋白;用1×Laemmli
上样缓冲液溶解CY和Mt蛋白,50度加热10
min后上样,上样量为5 μg和10
μg;
凝胶:RealPAGE类梯度PAGE凝胶快速电泳试剂盒(RTD6165)制胶,恒压200V
35 min;
转膜:0.45
μm NC膜,1×RealBlot湿转
400 mA 35min;
封闭:快速封闭液
RT 10 min;
一抗:mtHSP70单多抗
1:1000 RT孵育1小时;
二抗:羊抗兔IgG-HRP(货号:HGM1020)
1:5000 RT 60min;
检测:RealECL发光液(货号:EC2520)自动曝光1秒。