Anti-HSP60抗体（兔单抗）
Anti-HSP60 Antibody（Monoclonal Antibody from Rabbit）
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产品编号
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产品名称
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规格
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RGH1160
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Anti-HSP60抗体（兔单抗）
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20 μl
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● 产品简介
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来源
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用途及稀释比例
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抗体类型
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种属反应
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分子量
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Rabbit
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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单克隆抗体
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Human
Rat
Mouse
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变性
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~60 kD
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非变性
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~500 kD 7聚体
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注：WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry; IF,
Immunofluorescence
热休克蛋白HSP60是一种重要的分子伴侣，主要存在于线粒体基质，但在某些条件下也可能在胞浆中检测到少量 HSP60。主要负责促进线粒体内蛋白质的正确折叠和重折叠，它通过与其共伴侣HSP10共同作用，确保线粒体内合成的蛋白质能够正确折叠、转运，以维持细胞的正常功能。单个 HSP60 单体约 60 kDa，多个单体会组装成环状复合体，典型结构为两个七聚体环堆叠形成的双环结构，总共由14个亚基组成，每个环形成一个中央空腔，可容纳未折叠蛋白，HSP10与HSP60协同作用形成封闭折叠腔室。
本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。
● 贮存形式：
1 mg/ml抗体溶于PBS，50%甘油，pH7.2。
● 保存及运输条件：
-20℃保存，一年有效；避免反复冻融；湿冰运输。
● 使用说明：
1. Western Blot杂交(ECL显色)：1:5000-10000稀释，常温孵育1-2 h或4℃过夜。
2. 免疫荧光（IF）和免疫组化（IHC）：1:200-1000稀释。
● 实验示例：
1.变性检测：
K562细胞总蛋白HSP60检测
样品：K562细胞用Western&IP细胞裂解液（WL1020）提取，样品与5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（PL080）混合，95度加热5
min后上样，上样量为2-10 μl；
凝胶：RealPAGE类梯度PAGE凝胶快速电泳试剂盒（RTD6165）制胶，恒压200
V 35 min；
转膜：0.45
μm NC膜，1×RealBlot湿转
400 mA 35min；
封闭：快速封闭液
RT 10 min；
一抗：HSP60兔单抗
1:10000 RT孵育1小时；
二抗：羊抗兔IgG-HRP（货号：HGR1020）
1:5000 RT 60min；
检测：RealECL发光液（货号：EC2520）自动曝光107毫秒。
2. 非变性检测：
K562细胞总蛋白HSP60非变性检测
样品：K562加Western&IP细胞裂解液（WL1020），冰浴超声5 min，冰浴15 min， 13000 rpm 10 min取上清，样品与5×非变性非还原蛋白上样缓冲液（PL111）混合后上样，上样2.5，3.75，5，6.25，7.5
μg；
凝胶：4-15%RealPAGE Tris-Glycine预制胶（RTD6117-0415），1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液
200 V 50 min；
转膜：0.22μm NC膜，1×RealBlot湿转
400 mA 40 min；
封闭：快速封闭液 5 min
一抗：HSP60 兔单抗 1：10000 RT 60 min
二抗：羊抗兔IgG-HRP（货号：HGR1020）
1:5000 RT 60min；
检测：RealECL发光液（货号：EC2520）自动曝光400毫秒。